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有機(jī)氮源的產(chǎn)丁酸效果比無機(jī)氮源的效果更為顯著

發(fā)布時(shí)間:2021-02-12

浙江贊誠生物科技有限公司專注于大健康產(chǎn)業(yè)在化學(xué)、生物及發(fā)酵等領(lǐng)域的發(fā)展。主營產(chǎn)品涉及香精香料、飼料及食品添加劑、醫(yī)藥原料,化妝品原料,植物提取等多個(gè)系列精細(xì)化學(xué)品。公司團(tuán)隊(duì)專業(yè)從事化學(xué)品進(jìn)出口貿(mào)易10+年,與國內(nèi)外一百多家相關(guān)企業(yè)建立了穩(wěn)定的合作關(guān)系。公司總部位于浙江省杭州市,在印度孟買和荷蘭分別設(shè)立有辦事處。我們一直秉承“工藝技術(shù)為核心、產(chǎn)業(yè)鏈穩(wěn)定為保證”的業(yè)務(wù)開拓理念,執(zhí)著于”做受客戶稱贊的,誠實(shí)可靠的,專業(yè)的精細(xì)化學(xué)品供應(yīng)商“的服務(wù)理念,力求為全球市場穩(wěn)定供應(yīng)優(yōu)品質(zhì)、高性價(jià)、廣覆蓋的好產(chǎn)品。 ?

對(duì)產(chǎn)酸相的產(chǎn)物有影響?這是產(chǎn)酸相產(chǎn)物的限制性因素之一?5.2碳源對(duì)發(fā)酵法產(chǎn)丁酸的影響在微生物生長過程中碳源一直是重要的影響因素?生物發(fā)酵產(chǎn)丁酸的量和碳源有著密切的關(guān)系?一般葡萄糖的效果最好?其次是蔗糖和果糖[23]?但考慮到成本可以聯(lián)用蔗糖和丁二酸鈉作為復(fù)合碳源代替?zhèn)鹘y(tǒng)的單一碳源培養(yǎng)基[35]?這樣既能節(jié)約成本?又大大的提高了產(chǎn)丁酸的量?

 

5.3氮源對(duì)發(fā)酵法產(chǎn)丁酸的影響氮源分為無機(jī)氮源和有機(jī)氮源?二者對(duì)不同的微生物菌種的作用不同?通常無機(jī)氮源常用硫酸銨作為氮源?相比于使用單一氮源?有機(jī)氮源的產(chǎn)丁酸效果比無機(jī)氮源的效果更為顯著?其中以酵母膏的效果最好[36]?5.4底物和終產(chǎn)物對(duì)丁酸產(chǎn)量的影響許多代謝途徑都會(huì)受到它們自身終產(chǎn)物的抑制?在利用梭狀芽孢桿菌發(fā)酵產(chǎn)丁酸的過程中?丁酸、乳酸、乙酸、丁醇、乙醇和丙酮都會(huì)影響丁酸的產(chǎn)量[35 ̄36]?例如丁醇會(huì)改變膜的流動(dòng)性、膜功能和細(xì)胞內(nèi)ATP水平致使丁酸的產(chǎn)量降低?因此丁酸發(fā)酵也受到底物的抑制?未分解的丁酸通過細(xì)菌細(xì)胞膜進(jìn)入胞內(nèi)并最終被分解?它影響跨膜pH梯度并減少了微生物生長所需的能量

 

[36]?在生產(chǎn)過程中為了使丁酸濃度保持在抑制水平以下?曾經(jīng)用高稀釋率來降低丁酸濃度?但是?這不利于下游產(chǎn)物的純化?所以及時(shí)移出產(chǎn)物盡可能的降低丁酸濃度是非常重要的?5.5益生素對(duì)發(fā)酵法產(chǎn)丁酸的影響益生素是一種含有多種對(duì)微生物有益物質(zhì)的復(fù)合型生物制劑?因?yàn)樗粫?huì)對(duì)微生物產(chǎn)生毒殺效應(yīng)?且使用不會(huì)引起微生物產(chǎn)生抗性?因此益生素成為一種理想且綠色的可以替代傳統(tǒng)抗生素的添加劑[37]?5.6預(yù)處理方法對(duì)發(fā)酵法產(chǎn)丁酸的影響在微生物發(fā)酵時(shí)?為了提高底物的利用率?常對(duì)底物進(jìn)行預(yù)處理?目前常用的低成本預(yù)處理方法主要有加熱預(yù)處理和化學(xué)預(yù)處理?化學(xué)預(yù)處理又包括酸法預(yù)處理和堿法預(yù)處理?

 

5.6.1加熱預(yù)處理對(duì)發(fā)酵法產(chǎn)丁酸的影響加熱預(yù)處理是常用于厭氧發(fā)酵的一種物理預(yù)處理手段?生物細(xì)胞一旦被熱處理后?細(xì)胞的狀態(tài)就會(huì)發(fā)生一定的改變?例如結(jié)合水和蛋白質(zhì)等會(huì)透過膜釋放到胞外并水解?細(xì)胞在受到不同的預(yù)處理溫度加熱后?受損的細(xì)胞位置也不一樣:當(dāng)處理溫度在45~65°C時(shí)?細(xì)胞膜會(huì)遭到破壞?同時(shí)核糖體RNA也會(huì)降解?50~70°C時(shí)的熱預(yù)處理將使DNA變性?65~90°C時(shí)細(xì)胞壁瓦解導(dǎo)致細(xì)胞死亡?70~95°C高溫處理時(shí)蛋白質(zhì)分解成小分子肽段且易溶于水?成為很好的緩沖劑?讓被處理系統(tǒng)有較好的適應(yīng)pH變化的能力[38]?伴隨著不同的熱處理溫度?細(xì)胞在厭氧發(fā)酵中所產(chǎn)丁酸的量也會(huì)明顯不同?進(jìn)一步研究熱處理時(shí)間對(duì)細(xì)胞厭氧發(fā)酵產(chǎn)酸的影響?在80°C高溫下分別進(jìn)行了15、30、45、60min的丁酸厭氧發(fā)酵:當(dāng)放置時(shí)間為15min時(shí)發(fā)酵產(chǎn)酸量很低?隨著放置時(shí)間的逐漸延長?細(xì)胞發(fā)酵產(chǎn)酸量明顯上升?當(dāng)放置時(shí)間進(jìn)一步延長至30或45min時(shí)發(fā)酵液中丁酸濃度急劇上升?當(dāng)放置時(shí)間上升至45min后?酸的產(chǎn)量開始呈現(xiàn)出下降的趨勢?當(dāng)放置時(shí)間為15和60min時(shí)發(fā)現(xiàn)產(chǎn)丁酸的量非常低

 

[33]?熱處理時(shí)間太短會(huì)使得胞內(nèi)有機(jī)物不能被完全破壞溶解且還會(huì)影響細(xì)胞的破壁從而導(dǎo)致破壁緩慢甚至不徹底?預(yù)處理時(shí)間過長則會(huì)使有機(jī)物質(zhì)狀態(tài)發(fā)生改變或變質(zhì)?因此實(shí)驗(yàn)過程熱預(yù)處理時(shí)間可選擇30min?5.6.2酸法預(yù)處理對(duì)發(fā)酵法產(chǎn)丁酸的影響酸式預(yù)處理是一種化學(xué)預(yù)處理方法?在厭氧發(fā)酵反應(yīng)前加入強(qiáng)酸浸泡后的培養(yǎng)基底物?使細(xì)胞通透性增加?這樣胞內(nèi)生物大分子降解為小分子物質(zhì)后可釋放到胞外供產(chǎn)丁酸微生物利用?丁酸的厭氧發(fā)酵生產(chǎn)pH為4和5時(shí)?發(fā)酵液的丁酸濃度明顯提高?但pH為2和3時(shí)?發(fā)酵液中丁酸的濃度明顯低于pH為4和5時(shí)?原因是細(xì)胞處于強(qiáng)酸性條件時(shí)細(xì)胞中的有機(jī)物被較多破壞[33]?因此用酸對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行預(yù)處理可以使細(xì)胞的厭氧發(fā)酵能力增強(qiáng)?而且最優(yōu)條件為pH4~5?5.6.3堿法預(yù)處理對(duì)發(fā)酵法產(chǎn)丁酸的影響堿法預(yù)處理也屬于化學(xué)預(yù)處理方法?用堿性溶液調(diào)節(jié)細(xì)胞到特定的pH?可使細(xì)胞壁上蛋白質(zhì)的電荷性質(zhì)發(fā)生改變?從而改變細(xì)胞壁的通透性?釋放出生物小分子物質(zhì)[39]?提高產(chǎn)丁酸菌利用底物的效率。

 

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